技術摘要: |
一種篩選熱穩定蛋白質之製作方法,係將各物種之可溶性蛋白體進行不同溫度之熱處理,並以超高速離心法(Ultracentrifugation)製備於熱處理後而不會沉澱之可溶性蛋白質。該可溶性蛋白質於電泳(electrophoresis,EP)分離後,續以胰蛋白酶(trypsin)分解為胜肽質量指紋,最後以質譜儀對該胜肽質量指紋進行高通量分析,以達到快速鑑定蛋白質且篩選出有利用價值之熱穩定蛋白質。本發明能一次大量篩選熱穩定蛋白質,並以快速的質譜儀,確認蛋白質身份。故,由本發明篩選後,再繼續經由基因選殖確認其蛋白質之溶化溫度值,可節省很多時間、金錢及人力。
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解決的問題或達成的功效: |
能一次大量篩選熱穩定蛋白質,並以快速鑑定之質譜儀,確認蛋白質身份。
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應用領域: |
篩選熱穩定蛋白質之製作方法
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適用產品: |
生技公司
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IPC: |
G01N-033/483(2006.01);C07K-001/24(2006.01);G01N-030/72(2006.01)
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Claim 1: |
1.一種篩選熱穩定蛋白質之製作方法,其至少包括下列步驟:(A)選擇一物種之可溶性蛋白體;(B)將該物種之可溶性蛋白體於一控溫裝置中進行分別在55℃、65℃、75℃及85℃下熱處理30分鐘;(C)以一超高速離心法(Ultracentrifugation)製備於一熱處理後之可溶性蛋白質;(D)將該可溶性蛋白質於一電泳(electrophoresis,EP)分離,並以一胰蛋白酶(trypsin)將該可溶性蛋白質分解為一胜肽質量指紋;以及(E)以一質譜儀進行對該胜肽質量指紋進行高通量分析,以鑑定熱穩定蛋白質。
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